天津快乐十分走势图

产品搜索
产品目录
联系我们
公司:成都德麟科技天津快乐十分走势图
联系人:李经理
电话:028-64605117
传真:028-64605117
手机:18030829117,18086845117
邮编:610031
邮箱:[email protected]
地址:成都市金牛区金府路248号
技术文章
当前位置:天津快乐十分走势图 > 技术文章 > 非洲猪瘟现状及检测方法简介
非洲猪瘟现状及检测方法简介
点击次数:768 发布时间:2019-07-12

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触性传染病。临床上以猪高热、食欲废绝、皮肤发绀、内脏实质、器官出血、呼吸系统和神经系统功能紊乱为主要特征。被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的动物疫病,在我国倍列为一类动物疫病。该病病程极短,死亡率极高,已对发病国家的养猪业造成灾难性打击。

2018年7月,辽宁省沈阳市发生首例非洲猪瘟疫情,截止2019年上半年,全国共发生非洲猪瘟疫情100余起,包括25个省份(安徽、贵州、河南、黑龙江、湖北、湖南、吉林、江苏、辽宁、内蒙古、山西、陕西、天津、云南、浙江、重庆、江西、福建、四川、上海、北京、青海、广东、甘肃、宁夏),非洲猪瘟对我国养猪业的危害日益严峻。

ASFV是非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟病毒属的WEI一成员,病毒基因组全长170~ 190 kb ,为有囊膜的双股线状DNA病毒,病毒粒子大小为175~215 nm,呈正二十面体结构。该病毒可使各种日龄和品种的家猪与野猪感染并发病,病毒可在多数蜱种中增殖,使蜱成为病毒的贮藏宿主和主要传播媒介。该病毒最早于1921年在非洲东部肯尼亚首次被发现,随后开始在撒哈拉以南的非洲东部、中部、南部等地区蔓延。1957 年病毒从非洲的安哥拉传到欧洲的西班牙,病毒开始在欧洲呈零星、持续流行。1971 年病毒从西班牙传入南美洲的古巴,南美洲和拉丁美洲的多数国家陆续暴发疫情。2007年病毒传入欧亚接壤的高加索地区,随后开始向俄罗斯南部地区扩散流行,2017年传播至俄罗斯远东地区伊尔库茨克,导致传入我国的风险空前升高。2018年7月末,辽宁省沈阳市一养猪户饲养的猪陆续发生不明原因死亡,病死猪剖检发现脾脏异常肿大,疑似非洲猪瘟病毒感染,经国家外来动物疫病研究中心检测,确诊为非洲猪瘟病毒核酸阳性,通过序列分析发现引起该疫情的非洲猪瘟病毒B646L/p72基因序列与俄罗斯毒株100%匹配,与俄罗斯和东欧目前流行的格鲁吉亚毒株( Georgia 2007 )属于同-进化分支,这是我国发现的首例非洲猪瘟,目前阶段,面对非洲猪瘟还是以防疫销毁为主。那么问题来了,当猪类养殖户或者猪肉产品加工企业应该如何检测非洲猪瘟?依据哪些国家标准来进行检测呢?

有关非洲猪瘟的检测标准主要有:

 GB/T 18648-2002 《非洲猪瘟诊断技术》 、 

SN/T 1559-2010  《非洲猪瘟检疫技术规范》、 

SZDB/Z131-2015《非洲猪瘟病毒抗体检测阻断酶联免疫吸附法》 、 

T/CVMA 5-2018 《非洲猪瘟病毒实时荧光 PCR 检测方法》 等。

这其中 GB/T 18648-2002 《非洲猪瘟诊断技术》制定时,我国还尚未发现非洲猪瘟,所以只介绍了聚合酶链式反应试验(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)两种试验方法。更多具体检测试验方法可以依据SN/T 1559-2010  《非洲猪瘟检疫技术规范》来进行。其次,有关非洲猪瘟病毒鉴定检测的试验主要病毒红细胞吸附试验(HAD)、病毒荧光抗体试验(FAT)、聚合酶链式反应试验(PCR)、基因组Taqman探针荧光PCR试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接荧光抗体试验(IFAT)、免疫印迹试验等。

下面对主要的几种检测方法做一个简单的介绍

1. 胶体金试纸检测方法

胶体金试纸检测方法是以胶体金作为示踪标志物,利用层忻技术实现抗原抗体特异性检测的一种新型的免疫检测技术。该方法具有快速、灵敏、特异等优点,该方法操作简单,无需仪器设备,直接采血滴加到试纸条上20分钟即可查看结果,尤其适合临床的快速诊断,但该方法的敏感性较高,易出现假阳性。

2.PCR

PCR方法操作简单、检测快速,是目前最简单的分子生物学检测技木,但该方法的敏感性有限,且扩增后电泳检测需要使用溴化乙锭,具有一定的毒性。PCR检测方法具有很好的实用性,检测结果准确率较高,可以有效地应用于ASF的诊断以及防控。

3. 荧光定量PCR方法

实时荧光定量PCR方法是将光谱技术引入到PCR反应中,通过荧光信号的强弱变化定量测定特异性扩增产物的量,解决了常规PCR方法敏感性低和电泳检测中溴化乙锭对环境的污染问题。荧光定量PCR方法敏感性高、特异性强,已逐步成为ASFV的临床诊断、检疫、食品安全检验的重要方法。

 

4。 ELISA方法

     ELISA方法高通量、检测快速、操作简单,是目前常用的免疫学诊断技术,可用于猪群中ASFV感染的大规模调查。该方法具有敏感性高、重复性好、特异性强、准确性高等特点。但作为血清学检测技术该方法具有一定的滞后性,无法对ASFV的早期感染做出诊断。

在我国的《国家中长期动物疫病防治规划( 2012-2020)》中,ASF被列为优先防范的13种重大外来动物疫病之一,且我国已发生首例 ASF疫情,该病但在我国广泛流行,将给我国养猪业及养猪相关产业造成巨大冲击。目前应加强流行病学调直和主动监测排查工作,保持高度警惕,防止该病在我国的进一步流行。

本文简单介绍了ASF各种诊断技术方法的优缺点,综合比较来看,目前荧光定量PCR法是效果较好,污染较小的检测方法,广泛适用于养殖场、屠宰场、畜牧、疾控、食品企业、检测机构等领域,是非洲猪瘟防控的优选检测方法。

 

 

荧光定量PCR非洲猪瘟检测 配置方案

序号

名称

规格型号

单位

数量

备注

1

便携式实时荧光定量PCR仪

16孔   双通道

1

核心部件全进口

 

 

选配配件

序号

名称

规格型号

单位

数量

备注

1

迷你离心机

 

1

实验所需仪器

2

移液器

10μL

1

实验所需仪器

3

移液器

200μL

1

实验所需仪器

4

旋涡震荡仪

 

1

实验所需仪器

5

U

16G

1

数据储存

6

非洲猪瘟荧光检测PCR试剂盒

 

1

 

7

PCR八连管

 

30

实验所需耗材

8

10μL吸头

96支/盒

1

实验所需耗材

9

200μL吸头

96支/盒

1

实验所需耗材

10

1.5mL离心管

 

200

实验所需耗材

11

乳胶手套

 

30

个人防护

12

1.5mL离心管架

60

1

实验所需耗材

13

PCR管架

96

1

实验所需耗材

14

医用口罩

 

10

个人防护

15

记号笔

黑色

1

样本标记编号

16

计时器

 

1

实验计时

17

冰盒

蓝色

1

样品保存用

18

实验用剪刀

 

1

实验用

 

 
掌上彩票 天津快乐十分走势图天津快乐十分开奖结果查询 天津快乐十分 天津快乐十分开奖结果查询 天津快乐十分开奖结果查询 天津快乐十分 天津快乐十分开奖结果 天津快乐十分 天津快乐十分 天津快乐十分